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一、什么是噻唑藍(MTT)
噻唑藍,CAS號298-93-1,分子式C18H16BrN5S,是一種黃色或橙黃色粉末,熔點:195℃(分解)。微溶于甲醇中,但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。
二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理
噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
三、噻唑藍(MTT)的應用
MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。
四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點
優點:具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。
缺點:由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水,需要被溶解后才能檢測。使工作量增加,也會對實驗結果的準確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。
五、噻唑藍(MTT)注意事項
1、在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包。
2、制備好的MTT需要無菌,MTT對細菌很敏感。
3、MTT一般最好現用現配,過濾后4℃避光保存兩周內有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。
4、MTT有致癌性,小心使用,有條件最好帶透明的薄膜手套。通常,此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此,可以稱取MTT?0.5克,溶于100?mL的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養基中,用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌,放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。
一、什么是噻唑藍(MTT)
噻唑藍,CAS號298-93-1,分子式C18H16BrN5S,是一種黃色或橙黃色粉末,熔點:195℃(分解)。微溶于甲醇中,但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。
二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理
噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
三、噻唑藍(MTT)的應用
MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。
四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點
優點:具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。
缺點:由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水,需要被溶解后才能檢測。使工作量增加,也會對實驗結果的準確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。
五、噻唑藍(MTT)注意事項
1、在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包。
2、制備好的MTT需要無菌,MTT對細菌很敏感。
3、MTT一般最好現用現配,過濾后4℃避光保存兩周內有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。
4、MTT有致癌性,小心使用,有條件最好帶透明的薄膜手套。通常,此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此,可以稱取MTT?0.5克,溶于100?mL的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養基中,用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌,放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。
一、什么是噻唑藍(MTT)
噻唑藍,CAS號298-93-1,分子式C18H16BrN5S,是一種黃色或橙黃色粉末,熔點:195℃(分解)。微溶于甲醇中,但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。
二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理
噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
三、噻唑藍(MTT)的應用
MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。
四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點
優點:具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。
缺點:由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水,需要被溶解后才能檢測。使工作量增加,也會對實驗結果的準確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。
五、噻唑藍(MTT)注意事項
1、在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包。
2、制備好的MTT需要無菌,MTT對細菌很敏感。
3、MTT一般最好現用現配,過濾后4℃避光保存兩周內有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。
4、MTT有致癌性,小心使用,有條件最好帶透明的薄膜手套。通常,此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此,可以稱取MTT?0.5克,溶于100?mL的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養基中,用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌,放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。
一、什么是噻唑藍(MTT)
噻唑藍,CAS號298-93-1,分子式C18H16BrN5S,是一種黃色或橙黃色粉末,熔點:195℃(分解)。微溶于甲醇中,但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。
二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理
噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
三、噻唑藍(MTT)的應用
MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。
四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點
優點:具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。
缺點:由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水,需要被溶解后才能檢測。使工作量增加,也會對實驗結果的準確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。
五、噻唑藍(MTT)注意事項
1、在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包。
2、制備好的MTT需要無菌,MTT對細菌很敏感。
3、MTT一般最好現用現配,過濾后4℃避光保存兩周內有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。
4、MTT有致癌性,小心使用,有條件最好帶透明的薄膜手套。通常,此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此,可以稱取MTT?0.5克,溶于100?mL的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養基中,用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌,放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。
一、什么是噻唑藍(MTT)
噻唑藍,CAS號298-93-1,分子式C18H16BrN5S,是一種黃色或橙黃色粉末,熔點:195℃(分解)。微溶于甲醇中,但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。
二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理
噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值),來判斷活細胞數量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
三、噻唑藍(MTT)的應用
MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。
四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點
優點:具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。
缺點:由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水,需要被溶解后才能檢測。使工作量增加,也會對實驗結果的準確性產生影響,而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。
五、噻唑藍(MTT)注意事項
1、在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包。
2、制備好的MTT需要無菌,MTT對細菌很敏感。
3、MTT一般最好現用現配,過濾后4℃避光保存兩周內有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。
4、MTT有致癌性,小心使用,有條件最好帶透明的薄膜手套。通常,此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此,可以稱取MTT?0.5克,溶于100?mL的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養基中,用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌,放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。