噻唑藍(MTT)比色法原理及注意事項

　　一、什么是噻唑藍(MTT)

　　噻唑藍，CAS號298-93-1，分子式C18H16BrN5S，是一種黃色或橙黃色粉末，熔點：195℃(分解）。微溶于甲醇中，但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。

　　二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理

　　噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。

　　三、噻唑藍(MTT)的應用

　　MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。

　　四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點

　　優點：具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。

　　缺點：由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水，需要被溶解后才能檢測。使工作量增加，也會對實驗結果的準確性產生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。

　　五、噻唑藍(MTT)注意事項

　　1、在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包。

　　2、制備好的MTT需要無菌，MTT對細菌很敏感。

　　3、MTT一般最好現用現配，過濾后4℃避光保存兩周內有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存，避免反復凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。

　　4、MTT有致癌性，小心使用，有條件最好帶透明的薄膜手套。通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT?0.5克，溶于100?mL的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌，放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。

　　一、什么是噻唑藍(MTT)

　　噻唑藍，CAS號298-93-1，分子式C18H16BrN5S，是一種黃色或橙黃色粉末，熔點：195℃(分解）。微溶于甲醇中，但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。

　　二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理

　　噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。

　　三、噻唑藍(MTT)的應用

　　MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。

　　四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點

　　優點：具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。

　　缺點：由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水，需要被溶解后才能檢測。使工作量增加，也會對實驗結果的準確性產生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。

　　五、噻唑藍(MTT)注意事項

　　1、在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包。

　　2、制備好的MTT需要無菌，MTT對細菌很敏感。

　　3、MTT一般最好現用現配，過濾后4℃避光保存兩周內有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存，避免反復凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。

　　4、MTT有致癌性，小心使用，有條件最好帶透明的薄膜手套。通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT?0.5克，溶于100?mL的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌，放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。

　　一、什么是噻唑藍(MTT)

　　噻唑藍，CAS號298-93-1，分子式C18H16BrN5S，是一種黃色或橙黃色粉末，熔點：195℃(分解）。微溶于甲醇中，但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。

　　二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理

　　噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。

　　三、噻唑藍(MTT)的應用

　　MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。

　　四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點

　　優點：具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。

　　缺點：由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水，需要被溶解后才能檢測。使工作量增加，也會對實驗結果的準確性產生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。

　　五、噻唑藍(MTT)注意事項

　　1、在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包。

　　2、制備好的MTT需要無菌，MTT對細菌很敏感。

　　3、MTT一般最好現用現配，過濾后4℃避光保存兩周內有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存，避免反復凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。

　　4、MTT有致癌性，小心使用，有條件最好帶透明的薄膜手套。通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT?0.5克，溶于100?mL的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌，放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。

　　一、什么是噻唑藍(MTT)

　　噻唑藍，CAS號298-93-1，分子式C18H16BrN5S，是一種黃色或橙黃色粉末，熔點：195℃(分解）。微溶于甲醇中，但難溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能將其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的儲備液。

　　二、噻唑藍(MTT)比色法檢測原理

　　噻唑藍(MTT)比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。

　　三、噻唑藍(MTT)的應用

　　MTT通常用于細胞增殖、細胞活性測定和藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養細胞毒性的測定。

　　四、噻唑藍(MTT)比色法的優缺點

　　優點：具有簡便、快速、經濟、不使用同位素等優點。

　　缺點：由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水，需要被溶解后才能檢測。使工作量增加，也會對實驗結果的準確性產生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗人員的身體健康也有損害。

　　五、噻唑藍(MTT)注意事項

　　1、在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包。

　　2、制備好的MTT需要無菌，MTT對細菌很敏感。

　　3、MTT一般最好現用現配，過濾后4℃避光保存兩周內有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃長期保存，避免反復凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用。

　　4、MTT有致癌性，小心使用，有條件最好帶透明的薄膜手套。通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT?0.5克，溶于100?mL的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm微孔濾膜過濾除去溶液中的細菌，放置4℃避光保存即可。在配制和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。