免疫診斷試劑制備的特點

免疫診斷試劑是診斷試劑中品種最多的，在臨床診斷領域應用十分廣泛，主要用于傳染性疾病檢測、內分泌檢測、腫瘤檢測、孕檢等，也可用于藥物檢測。免疫診斷試劑生產采用的工藝包括反應板或固相載體的選擇、抗原抗體的篩選、標記物的篩選標記、顯色劑及示蹤劑等溶液的配制、校準品的配制與校準等環節，每個環節具有不同的特點及注意事項，接下來小編將以癌胚抗原（CEA）酶聯免疫法為例予以說明。

酶聯免疫法的核心就是讓抗體與酶復合物結合，然后通過顯色來檢測，所以固相載體、抗原抗體及顯色劑的選擇尤為重要。聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等物質都可作為固相載體，形式通常為凹孔平板、試管、珠粒等。

關于校準品的配制，利用小牛血清作為基質來配制校準品。即向小牛血清中加入CEA抗原，配制不同濃度梯度的系列校準品。需要注意的是，校準品的配制要參考CEA的人群分布濃度及不同原理的線性范圍，另外，校準品的調試與定值需要通過試驗反復進行。

其次，關于標記物（酶標記抗體）要選擇適宜的標記底物，還要注意標記濃度。以不同的CEA抗體做HRP（辣根過氧化物酶）標記并進行免疫分析，比較各種標記物零標準的OD（光密度）值、標準曲線形狀，擇優選擇抗體為標記底物。制備標記物時，HRP與CEA的量采用不同的重量比，分別建立標準曲線進行比較，并篩選標記物質量較佳的標記條件。分析中，標記物相對于抗原所需是過量的，需通過耐量試驗選擇適宜濃度。

對于顯色劑的選擇，要求價廉、安全、有明顯的顯色反應且本身無色。TMB和ABTS是當前應用普遍且效果好的酶免顯色底物。TMB具有高靈敏度，高穩定性、安全性等優點,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，通過標準曲線計算樣品中人癌胚抗原濃度。ABTS用于酶聯免疫實驗，產生一種可溶性的顯綠色的螯合物，可使用405 nm光譜讀取OD值，可使用1%SDS終止反應。

免疫診斷試劑是診斷試劑中品種最多的，在臨床診斷領域應用十分廣泛，主要用于傳染性疾病檢測、內分泌檢測、腫瘤檢測、孕檢等，也可用于藥物檢測。免疫診斷試劑生產采用的工藝包括反應板或固相載體的選擇、抗原抗體的篩選、標記物的篩選標記、顯色劑及示蹤劑等溶液的配制、校準品的配制與校準等環節，每個環節具有不同的特點及注意事項，接下來小編將以癌胚抗原（CEA）酶聯免疫法為例予以說明。

酶聯免疫法的核心就是讓抗體與酶復合物結合，然后通過顯色來檢測，所以固相載體、抗原抗體及顯色劑的選擇尤為重要。聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等物質都可作為固相載體，形式通常為凹孔平板、試管、珠粒等。

關于校準品的配制，利用小牛血清作為基質來配制校準品。即向小牛血清中加入CEA抗原，配制不同濃度梯度的系列校準品。需要注意的是，校準品的配制要參考CEA的人群分布濃度及不同原理的線性范圍，另外，校準品的調試與定值需要通過試驗反復進行。

其次，關于標記物（酶標記抗體）要選擇適宜的標記底物，還要注意標記濃度。以不同的CEA抗體做HRP（辣根過氧化物酶）標記并進行免疫分析，比較各種標記物零標準的OD（光密度）值、標準曲線形狀，擇優選擇抗體為標記底物。制備標記物時，HRP與CEA的量采用不同的重量比，分別建立標準曲線進行比較，并篩選標記物質量較佳的標記條件。分析中，標記物相對于抗原所需是過量的，需通過耐量試驗選擇適宜濃度。

對于顯色劑的選擇，要求價廉、安全、有明顯的顯色反應且本身無色。TMB和ABTS是當前應用普遍且效果好的酶免顯色底物。TMB具有高靈敏度，高穩定性、安全性等優點,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，通過標準曲線計算樣品中人癌胚抗原濃度。ABTS用于酶聯免疫實驗，產生一種可溶性的顯綠色的螯合物，可使用405 nm光譜讀取OD值，可使用1%SDS終止反應。

免疫診斷試劑是診斷試劑中品種最多的，在臨床診斷領域應用十分廣泛，主要用于傳染性疾病檢測、內分泌檢測、腫瘤檢測、孕檢等，也可用于藥物檢測。免疫診斷試劑生產采用的工藝包括反應板或固相載體的選擇、抗原抗體的篩選、標記物的篩選標記、顯色劑及示蹤劑等溶液的配制、校準品的配制與校準等環節，每個環節具有不同的特點及注意事項，接下來小編將以癌胚抗原（CEA）酶聯免疫法為例予以說明。

酶聯免疫法的核心就是讓抗體與酶復合物結合，然后通過顯色來檢測，所以固相載體、抗原抗體及顯色劑的選擇尤為重要。聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等物質都可作為固相載體，形式通常為凹孔平板、試管、珠粒等。

關于校準品的配制，利用小牛血清作為基質來配制校準品。即向小牛血清中加入CEA抗原，配制不同濃度梯度的系列校準品。需要注意的是，校準品的配制要參考CEA的人群分布濃度及不同原理的線性范圍，另外，校準品的調試與定值需要通過試驗反復進行。

其次，關于標記物（酶標記抗體）要選擇適宜的標記底物，還要注意標記濃度。以不同的CEA抗體做HRP（辣根過氧化物酶）標記并進行免疫分析，比較各種標記物零標準的OD（光密度）值、標準曲線形狀，擇優選擇抗體為標記底物。制備標記物時，HRP與CEA的量采用不同的重量比，分別建立標準曲線進行比較，并篩選標記物質量較佳的標記條件。分析中，標記物相對于抗原所需是過量的，需通過耐量試驗選擇適宜濃度。

對于顯色劑的選擇，要求價廉、安全、有明顯的顯色反應且本身無色。TMB和ABTS是當前應用普遍且效果好的酶免顯色底物。TMB具有高靈敏度，高穩定性、安全性等優點,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，通過標準曲線計算樣品中人癌胚抗原濃度。ABTS用于酶聯免疫實驗，產生一種可溶性的顯綠色的螯合物，可使用405 nm光譜讀取OD值，可使用1%SDS終止反應。

免疫診斷試劑是診斷試劑中品種最多的，在臨床診斷領域應用十分廣泛，主要用于傳染性疾病檢測、內分泌檢測、腫瘤檢測、孕檢等，也可用于藥物檢測。免疫診斷試劑生產采用的工藝包括反應板或固相載體的選擇、抗原抗體的篩選、標記物的篩選標記、顯色劑及示蹤劑等溶液的配制、校準品的配制與校準等環節，每個環節具有不同的特點及注意事項，接下來小編將以癌胚抗原（CEA）酶聯免疫法為例予以說明。

酶聯免疫法的核心就是讓抗體與酶復合物結合，然后通過顯色來檢測，所以固相載體、抗原抗體及顯色劑的選擇尤為重要。聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等物質都可作為固相載體，形式通常為凹孔平板、試管、珠粒等。

關于校準品的配制，利用小牛血清作為基質來配制校準品。即向小牛血清中加入CEA抗原，配制不同濃度梯度的系列校準品。需要注意的是，校準品的配制要參考CEA的人群分布濃度及不同原理的線性范圍，另外，校準品的調試與定值需要通過試驗反復進行。

其次，關于標記物（酶標記抗體）要選擇適宜的標記底物，還要注意標記濃度。以不同的CEA抗體做HRP（辣根過氧化物酶）標記并進行免疫分析，比較各種標記物零標準的OD（光密度）值、標準曲線形狀，擇優選擇抗體為標記底物。制備標記物時，HRP與CEA的量采用不同的重量比，分別建立標準曲線進行比較，并篩選標記物質量較佳的標記條件。分析中，標記物相對于抗原所需是過量的，需通過耐量試驗選擇適宜濃度。

對于顯色劑的選擇，要求價廉、安全、有明顯的顯色反應且本身無色。TMB和ABTS是當前應用普遍且效果好的酶免顯色底物。TMB具有高靈敏度，高穩定性、安全性等優點,TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，通過標準曲線計算樣品中人癌胚抗原濃度。ABTS用于酶聯免疫實驗，產生一種可溶性的顯綠色的螯合物，可使用405 nm光譜讀取OD值，可使用1%SDS終止反應。